牛奶β-内酰胺酶测量价格-先驱威锋技术-镇江牛奶β-内酰胺酶

β-内酰胺酶测量分析仪纸片酸度定量法

[原理] β-内 酰胺酶能破坏青霉中的β-内酰胺环，形成青霉唑酸，使PH降低，指示剂BCP法颜色由紫变黄。

[方法]①将一小片Whatman滤纸放于空平皿中。

②让滤纸吸足青霉溶液(0.05M 磷酸缓冲液，牛奶β-内酰胺酶测量厂家，PH8.0+0.2%BCP法+5%无缓冲剂的结晶青霉)。

③用接种环把10-20个菌落涂到滤纸上，

④盖好平皿后， 将滤纸片在37°C孵育30分钟，观察.结果。

[结果]产β -内酰胺酶的菌株使滤纸颜色由兰色变黄色，一般在10分钟内即能看到。

β-内酰胺酶测量分析仪4种途径

(1)产生β-内酰胺酶使β-内酰胺类抗生素开环失活，这是产生耐药的主要原因。目前发现的β-内酰胺酶已超过300种，它通过与β-内酰胺环上的羰基共价结合，水解酰胺键从而使β-内酰胺类抗生素开环而失活。

(2)改变抗生素与青结合蛋白( penicllin binding proteins，PBPs) 的亲和力。当β-内酰胺类抗生素与PBP结合后，PBP就会失去酶活性，使细菌细胞壁的形成部位破损而引起溶菌，反之，则，成为耐药菌。PBP 基因的变异，使β-内酰胺类抗生素无法与之结合或结合能力降低，这是形成耐药的根本原因。

(3) 细胞膜和细胞壁的结构发生改变，使难以进入细菌内。如生物膜的形成。

(4)细菌体内的能力依赖性主动转运机制，将已进入细菌内的抗生素泵出体外，也可导致耐药性。

β-内酰胺酶测量分析仪碘量法

[原理]β-内酰胺酶能裂解青霉的β-内酰胺环形成青霉唑酸，镇江牛奶β-内酰胺酶测量，它与淀粉竞争游离碘，牛奶β-内酰胺酶测量价格，破坏了碘和淀粉的兰色复合物，使兰色变为无色。

[方法] ①将0.25克.青霉溶于41.7mlPH6.0 的磷酸盐缓冲液中，牛奶β-内酰胺酶测量哪家好，使其浓度成6000ug/ml。 取0.1ml

于一小试管中。

②将培养18-24小时的细菌在含青霉试管内制成浓厚菌悬液(109/ml)。

③在37'C水浴中放置30分钟，不时摇动，使酶能破坏青霉。

④加入1%可溶性淀粉溶液0.5ml，摇匀。

⑤加入碘液 0.02 ml。

⑥在 37°C水浴中放置10分钟，观察结果。

[结果]在10分钟内能使兰色完全消退的菌株为β-内酰胺酶阳性，不消退者为阴性。

[注意事项] 

①由于青霉很容易分解，因而用于实验的青霉应新鲜配制。

②淀粉也新鲜配制，在100ml蒸馏水中加入1克可溶性淀粉，放到开水中水浴直到淀粉溶解。

③实验应 按照步骤操作，如果碘加得过早，酶反应就会停止，产生假阴性结果。

④每次试验用阳性和阴性对照。