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抑菌圈测定仪操作步骤

1.抑菌圈法常用于产生菌的分离筛选。工具菌采用的敏感菌。若被检菌能分泌某些抑制工具菌生长的物质，如等，便会在该菌落周围形成工具菌不能生长的抑菌圈，很容易被鉴别出来。　　

2.用接种环挑取各试管斜面的于带玻璃珠的无菌水中，用手振荡数分钟使孢子分散，过滤后制成混合孢子悬液。

3.向各培养皿内注入15Ml-20ml的熔化状琼脂培养基，将菌液与培养基混合均匀，待其冷却。　　

4.用无菌吸管向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。　　

5.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻，取出置于带菌培养基平板的中央，盖上盖子。　　

6.置适宜温度下，培养2-3天，观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。　　

7.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液，即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液，并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。　　

8.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理，操作必须在无菌室（或无菌箱）内于火焰旁进行。　　

9.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高（一般为45℃左右），否则会引起微生物。也不能太低，因为琼脂会很快凝结，以致搅拌不均匀，影响试验结果。　　

10.各种微生物的较适生长温度不同（例如霉菌一般为25-30℃，细菌一般为32-37℃等），恒温培养时宜分开放置。

抑菌圈测定仪缘检测的成功率

用灰度阈值法分割图像，未报道测量精度；借助的硬件系统，用基于灰度直方图的图像分割法，也未报道测量精度；用预定义区域和灰度阈值相结合的方法，获得了较高的测量精度，但为排除其他边缘的影响，需人工调整预定义区域和灰度阈值，自动化程度不够高；一种在众多边缘中自动检测抑菌圈边缘的方法，提高了自动化程度，对来自摄像头和数码相机的图像获得了很好的效果，但对来自扫描仪的图像边缘检测成功率较低，原因在于培养皿底部气泡和污垢对图像产生了较为严重的影响。若能在检测抑菌圈边缘之前，对图像进行适当的预处理，大限度地消除其他边缘的影响，将有利于提高抑菌圈边缘检测的成功率。

抑菌圈测定仪滤纸片法：

将一定大小蘸有药液的小滤纸片，放在含菌培养基平面上，因药剂的扩散作用形成不同的抑菌圈，以此比较药剂的毒力。此法是杀菌剂生物测定中应用广泛的方法之一，主要用于物质的筛选、药剂在植物体内残留测定及药剂变质和组分差异的测定。是把定量滤纸用打孔器打成直径6～8毫米的小片，经灭菌后浸蘸含有物质的不同浓度的稀释液或用滴管将一定量的微量药液滴在小滤纸片上，晾干后置于含菌培养基平面上。适温培养一定时间后，由于药剂的渗透和扩散作用即形成抑菌圈。根据抑菌圈直径（或直径平方）与药剂浓度对数成函数关系，绘出药量一反应毒力回归线。在一定浓度范围内，以抑菌圈直径为纵轴，以药剂浓度对数值为横轴画出直线。测定时根据标准药剂的标准曲线来比较所测药剂的毒力或进行定性定量分析。

抑菌圈测定仪微生物检定法

应记录检定菌的名称，培养基的编号、批号及其pH值，灭菌缓冲液的名称及pH值，标准品的来源、批号及其纯度或效价，供试品及标准品的称量（平行试验2份），溶解及稀释步骤和核对人，高低剂量的设定，抑菌圈测量数据（当用游标卡尺测量直径时，应将测得的数据以框图方式顺双碟数记录；当用抑菌圈测量仪测量面积或直径时，应记录测量仪器的名称及型号，并将打印数据贴附于记录上），计算式与结果，可靠性测验与可信限率的计算。