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抑菌圈测定仪测量与计算法：

（1）测量效价：高低剂量法，包括国家药典规定的二剂量﹑三剂量法及一剂量法；

（2）测量敏感性，采用带校正的排序法；

（3）测量一个双碟的时间≤0.04秒；

（4）测量单个抑菌圈的直径，仪器的重现性的相对标准误差<0.1%；

（5）旋转定标圈，仪器对其四个方向上的均匀度的相对标准误差<0.1%；

（6）对同一组检品的效价值，仪器的重复测量误差<0.5%；

不同培养基的体积对抑菌圈的抑菌圈测定仪

（1）接种液准备：按照标准规定，用PBS缓冲液稀释细菌悬液至1×106cfu/mL～5×106cfu/mL。

（2）培养基准备：分别用移液制备10 mL、15mL、20 mL、25 mL四个不同体积的培养基各6个（3个用于ATCC6538金黄色，另3个用于8099大肠）。

（3）试样接种：用无菌棉拭子蘸取接种菌液，在平皿的培养基表面均匀涂抹3次，每涂抹1次，平皿转动60°，后将棉拭子绕平皿边缘涂抹一周，盖上盖子，置室温干燥5 min。

（4）贴试样：将试样平贴在培养基上，用无菌镊子轻压试样，使其紧贴培养基表面。每个培养基贴一块试样于中间位置。

（5）培养：倒置平皿，放入生化培养箱中37℃培养16h～18 h。

（6）测量：测出每个平皿中的抑菌圈外沿总宽度及试样总宽度，进而算出抑菌圈宽度，求出平均值。

从试验结果可看出，不同体积的培养基对抑菌圈的影响还是比较大的。培养基体积为10 mL和15 mL时，抑菌圈相差不大，但当培养基增加到20 mL时，抑菌圈骤降，下降率超过20%。总体来说，随着培养基体积的增加，厚度也，但抑菌圈却反而变小。原因可能是体积增大，越多的剂渗透到了培养基底层，从而影响了表面的抑菌圈大小。

抑菌圈测定仪的由来

抑菌圈(Zone of inhibition)是福莱明发现青的过程中，提出的一个词汇。他发现,接种了青霉的培养皿中，青霉的周围不生长细菌,而在远离青霉的地方有细菌生长。不生长细菌的地方，是一个以青霉菌落为圆心的一个规则的圆，这个圆圈被福莱明称为抑菌圈。

后来，福莱明发现，这个抑菌圈的出现与青霉分泌的青有关，青有杀菌的作用，将青霉周围一定范围内的细菌全部，所以形成了一个以青霉为圆心的没有细菌生长的抑菌圈。抑菌圈直径大小以 mm 作为计量单位。

抑菌圈测定仪试验过程

1.用接种环挑取各试管斜面的于带玻璃珠的无菌水中，用手振荡数分钟使孢子分散，过滤后制成混合孢子悬液。

2.用无菌吸管（或针筒）向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。

3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基（约45℃），将菌液与培养基混合均匀，待其冷却。

4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻，取出置于带菌培养基平板的中央，盖上盖子

5.置适宜温度下，培养2~3d，观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。